Главные герои
Иван Петрович Войницкий, дядя Ваня — человек около сорока семи лет, много лет управлявший имением и работавший ради профессора Серебрякова. Умён, ироничен, но переживает тяжёлый кризис: считает, что лучшие годы отданы чужой славе. Влюблён в Елену Андреевну.
Александр Владимирович Серебряков — отставной профессор, отец Сони. Привык к уважению и заботе окружающих. Болезни, капризы и эгоцентризм делают его присутствие в имении тяжёлым для всех.
Елена Андреевна — молодая жена Серебрякова. Красива, образованна, но внутренне пассивна и скучает. Её присутствие пробуждает чувства Войницкого и Астрова.
Софья Александровна, Соня — дочь Серебрякова от первого брака. Трудолюбива, искренна, добра. Любит Астрова, но её чувство остаётся без ответа.
Михаил Львович Астров — земский врач. Умный, энергичный, много работает, интересуется судьбой лесов и будущим природы. Устал от постоянной врачебной практики и от человеческих страданий. Испытывает влечение к Елене.
Мария Васильевна Войницкая — мать дяди Вани, вдова тайного советника. Продолжает уважать Серебрякова и верить в его учёность, чем раздражает сына.
Илья Ильич Телегин, Вафля — обедневший помещик, живущий при семье. Добродушен, предан дому, пережил несчастливую семейную историю.
Марина — старая няня. Спокойная, практичная, связана с привычным укладом дома.
Работник — эпизодический персонаж, напоминающий о хозяйственной и будничной стороне жизни.